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都正科普 | 你的DNA获取可能是这样的
发布时间:2018-10-25

核酸在生物的繁衍、发育、维持、衰老和死亡等一切生命活动中扮演着重要的角色,如果其结构出现稍许的变动,比如一个碱基的差错、缺失或增加,就有可能导致突变、缺陷或疾病的出现。临床核酸和基因检测是指利用分子生物学技术检测人体各种标本中的内源性基因或外源性核酸物质,以获得反应机体致病因素、疾病状态、病情变化等方面的实验结果。为了研究DNA信息,获取机体健康状况,提取DNA并对基因进行扩增和分析是必不可少的,DNA提取有多重要,举个“栗子”就知道了:



2017年10月发表在Nature biotech杂志上的文章,IF:41.6,实验样本数仅2个!关键是,这2个样本,被均匀分装后,分送至11个国家的21个实验室,分别进行实验,而这21个实验室所获得的DNA,被送至一家测序中心进行建库和测序,以排除实验测序阶段对结果的影响。

进行核酸研究的第一个前提就是从样品中提取一定纯度和数量的基因组DNA。所以今天和大家共同分享一下核酸提取方面的知识。


DNA提取的原则


1、保证DNA一级结构的完整性;

2、提取的DNA样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂及过高浓度的金属离子;

3、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度;

4、排除其它核酸分子(RNA)的污染。


DNA提取的方法

DNA提取方法有多种,如CTAB法、SDS法、磁珠法等,随着科学技术发展,手工提取逐渐被自动化仪器所取代,下面简要介绍我们实验室的操作流程。


1.提取、纯化DNA

全自动DNA提取仪,细胞裂解、漂洗、洗脱等操作步骤一体化。


▲试剂槽


▲自动核酸提取仪

2.检测纯化后的DNA质量


通过琼脂糖凝胶电泳进行核酸的分离和纯化,以及Nanodrop法检测DNA浓度。



▲琼脂糖凝胶电泳结果展示图


▲分光光度计及其分析结果



需要强调的是,上面提到的DNA提取方法及策略并不是一成不变的,在实际工作中我们可以根据所提取材料的不同、提取结果的差异,灵活调整实验方案,目的只有一个,提取到纯度高、完整性好、得率高的DNA样品,以满足我们后续的基因分析需求。如果您有基因检测相关的需求,欢迎咨询我们!


都正检验实验室,参照 ISO17025、ISO15189和ISO 9001等标准体系建设。依托创新技术服务平台和信息化管理系统,制定了符合国际标准的生物样本采集规范,开发了符合临床需求和国际标准的生物样本库信息化管理系统。






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